本試劑盒采用探針法實時熒光PCR方法(含豬源內(nèi)質(zhì)控)檢測豬全血、血清、淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、扁桃體、骨髓及口鼻拭子等樣品中非洲豬瘟病毒(ASFV)的DNA,適用于非洲豬瘟病毒的檢測,本試劑盒無法區(qū)分出基因缺失型病毒。AD-001-0為普通探針法;AD-001-1為防污染體系,添加dUTP和UNG酶可有效減少氣溶膠等的污染,降低假陽性風(fēng)險。
| 組成 | 100頭份 | 貯藏條件 |
| 陰性對照(無核酸酶水) | 1 mL | -20℃ |
| 陽性對照 | 20 μL | |
| PCR 反應(yīng)液 | 900 μL | |
| 非洲豬瘟引物、探針、內(nèi)質(zhì)控混合液* | 900 μL | |
| 說明書 | 1 份 |
在熒光PCR 擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下反應(yīng):95 ℃ 2 min;循環(huán) 95 ℃ 5 s,60 ℃ 30 s,共45 次,每次循環(huán)的第二步(60 ℃ 30 s)收集熒光信號。(報告基團(tuán)“非洲豬瘟基因-FAM、內(nèi)質(zhì)控-HEX”,淬滅基團(tuán)“None” 使用ABI 7500儀器時,由于無HEX通道建議用VIC通道代替,退火時間設(shè)置至少為31 s)。防污染體系A(chǔ)D-001-1在預(yù)變性步驟(95 ℃ 2 min)之前進(jìn)行消化步驟50 ℃ 2 min。

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